pcr擴增的原理

PCR擴增的基本原理類似於DNA的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

PCR是一種體外DNA擴增技術,是在模板DNA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下,依賴於DNA聚合酶的酶促合反應,將待擴增的DNA片段與其兩側互補的寡核苷酸鏈引物經“高溫變性——低溫退火——引物PCR擴增儀延伸”三步反應的多次循環,使DNA片段在數量上呈指數增加,從而在短時間內獲得我們所需的大量的特定基因片段。在環境檢測中,靶核酸序列往往存在於—個複雜的混合物如細胞提取液中,且含量很低,對於探測這種複雜羣體中的特異微生物或某個基因,雜交就顯得不敏感。使用PCR技術可將靶序列放大幾個數量級,再用探針雜交探測對被擴增序列作定性或定量研究分析微生物羣體結構。PCR技術常與其他技術結合起來使用,如RT-PCR、競爭PCR、槽式PCR、RAPf)、ARDRA等。