1、使用前的處理:在使用緩衝鹽作流動相之前需要用不含緩衝鹽的流動相沖洗色譜柱，直至基線平穩。原則上，用於沖洗的流動相與分析時所用的流動相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用於沖洗用的流動相中不含緩衝鹽。理由、緩衝鹽通常易溶於水，難溶於有機溶劑。用含緩衝鹽的（特別是做流動相的水為飽和的緩衝鹽溶液時）流動相進行分析時，如果分析前色譜柱中用於儲存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小，不先沖洗掉，接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩衝鹽時，緩衝鹽將會在色譜柱柱體上析出，沉積下來，這將可能導致上述對色譜柱的損害。
2、使用後的處理：用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相唯一的區別是，用於沖洗的流動相不含緩衝鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期儲存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩。用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相唯一的區別是，用於沖洗的流動相不含緩衝鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期儲存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩.緩衝液可以提供離子平衡的反離子，並使流動相保持一定的離子強度和ph值，減少拖尾。
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1、使用前的處理:在使用緩衝鹽作流動相之前需要用不含緩衝鹽的流動相沖洗色譜柱，直至基線平穩。原則上，用於沖洗的流動相與分析時所用的流動相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用於沖洗用的流動相中不含緩衝鹽。理由、緩衝鹽通常易溶於水，難溶於有機溶劑。用含緩衝鹽的（特別是做流動相的水為飽和的緩衝鹽溶液時）流動相進行分析時，如果分析前色譜柱中用於儲存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小，不先沖洗掉，接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩衝鹽時，緩衝鹽將會在色譜柱柱體上析出，沉積下來，這將可能導致上述對色譜柱的損害。
2、使用後的處理：用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相唯一的區別是，用於沖洗的流動相不含緩衝鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期儲存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩。用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相唯一的區別是，用於沖洗的流動相不含緩衝鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期儲存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩.緩衝液可以提供離子平衡的反離子，並使流動相保持一定的離子強度和ph值，減少拖尾。
1、使用前的處理:在使用緩衝鹽作流動相之前需要用不含緩衝鹽的流動相沖洗色譜柱，直至基線平穩。原則上，用於沖洗的流動相與分析時所用的流動相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用於沖洗用的流動相中不含緩衝鹽。理由、緩衝鹽通常易溶於水，難溶於有機溶劑。用含緩衝鹽的（特別是做流動相的水為飽和的緩衝鹽溶液時）流動相進行分析時，如果分析前色譜柱中用於儲存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小，不先沖洗掉，接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩衝鹽時，緩衝鹽將會在色譜柱柱體上析出，沉積下來，這將可能導致上述對色譜柱的損害。
2、使用後的處理：用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相唯一的區別是，用於沖洗的流動相不含緩衝鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期儲存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩。用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相唯一的區別是，用於沖洗的流動相不含緩衝鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期儲存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩.緩衝液可以提供離子平衡的反離子，並使流動相保持一定的離子強度和ph值，減少拖尾。
新買的高效液相色譜柱在正式使用之前需要做什麼？比如什麼配比的流動相沖洗？
新購買的“高效液相色譜柱”一般 需要做一下3點：
1：用甲醇沖洗柱子30分鐘到1個小時；
2：在1的步驟下，使用甲醇：水=1：:9 作為流動相沖洗柱子30分鐘以上；
3：完成上面2步才能用流動相沖洗柱子30分鐘以上。再進樣。
上面得甲醇為色譜級，水一般選擇超純水、二次蒸餾水。流動相都需過0.45um的膜過濾、脫氣才可以使用。
另外：流動相應選擇合適的PH更好的保護柱子
很長時間不用的色譜柱要用了，需要做什麼前處理麼？
如果色譜柱的堵頭，兩邊都密封得很好的話應該沒什麼問題。
可以先拿甲醇或者乙腈，低流速，0.4-0.6ml/min沖洗半個小時。然後在用甲醇水衝開。長時間不用，柱子裡面的甲醇或者乙腈有可能揮發掉了，到時候就可能會幹了。先用低流速衝一陣子，免得對填料有損傷。
使用新色譜柱時有哪些注意事項?
簡單來說：看說明書→沖洗乾淨系統→活化柱子→效能測試，完成了就可以用於檢測樣品了。
詳細的如何維護色譜柱和色譜系統才是關鍵，詳細的介紹可以瀏覽agilent，waters等色譜網站的相關知識。
色譜柱的安裝：
1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積，進樣閥、柱子、檢測器之間的連線管路內徑儘可能使用內徑較小的管線，同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連線管線的長度。安裝色譜柱之前，確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較複雜的樣品建議安裝保護柱。
2、為了使色譜柱與儀器系統達最佳的連線效果，應儘量使用與色譜柱介面相匹配的螺帽和錐形接頭，如原來的接頭長期匹配其他型別的色譜柱，建議在連線新色譜柱前應檢查匹配情況，避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK 材料的通用接頭，只需用手擰緊不需要特定扳手，使用壓力為5000psi；使用溫度不得超過100℃。
流動相平衡：
1、在進行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩衝液應當天配製以保持新鮮避免細菌產生。
2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩衝液與其他流動相混合後應重新過濾避免溶解度變化造成產生新的沉澱。不應使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱，以免柱效能損壞（新增5％的有機溶劑沖洗色譜柱，同時可以達到對緩衝鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡）。
3、流動相需脫氣後使用，可避免因氣泡導致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱儲存使用的流動相有較大區別，應該使用過度分佈的形式進行平衡。避免由於流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩衝鹽結晶造成對色譜柱和儀器系統的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。
樣品製備與操作：
1、樣品應當儘可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外，如使用強溶劑溶解樣品柱子的解析度將可能降低。
2、樣品溶液在進樣前應使用針頭式過濾器對樣品預先過濾。頻繁改變流動相組成，會加速降低柱效。
3、色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得最佳分離效果，使用時請不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會造成矽膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外最高操作溫度不要超過60℃。
儲存色譜柱：
1、如果流動相含有酸或無機鹽，應當先用去離子水（20倍柱體積）沖洗乾淨。然後用用100％乙腈或甲醇儲存色譜柱。最後用柱子的接頭密封，並放在穩定的環境中存放。
2、應避免色譜柱受到直接的機械衝擊或摔落，避免造成色譜柱效能的降低。
色譜柱的再生：
1、用相當於20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子，建議按柱子的箭頭方向沖洗，儘可能不反衝：沖洗時使用的的參考溶劑順序是水、甲醇、氯仿、異丙醇、甲醇。
樣品溶液進色譜柱前應做如何處理
樣品溶液進色譜柱前應這樣處理：
樣品預處理應包括進樣前的一切操作。除了稱重、溶解、稀釋等步驟外,樣品需要: ①過濾; ②萃取; ③衍生化(柱前衍生) ; ④液相色譜(低壓柱層析) 。這些操作可以是手工進行或實行自動化操作。樣品預處理的目的是除去幹擾物、增加檢測器靈敏度(富集) 、保護色譜柱等。
樣品預處理同時也是為了避免色譜分離故障,其中樣品萃取是關鍵的一步,要從大量的干擾物中萃取出微量組分難度極大。
有些樣品經預處理後還不能作進樣分析,需進行衍生化處理,使一些無紫外吸收或無熒光的組分,經過衍生化後能用紫外和熒光檢測器檢測,這樣既提高了靈敏度,又改善了分離度(質量變化) 。樣品預處理的同時也會帶來一些問題,如樣品損失、樣品被汙染、衍生化反映不完全或多種反應物生成等。衍生反應常會影響試驗的精確度,或者在整個樣品預處理過程中帶來誤差。
用於液相色譜分析的樣品溶液必須均勻而無顆粒,有顆粒會損壞進樣器並阻塞柱頭。處理好的樣品在準備上柱前應對準光線搖動,檢查樣品溶液中有無顆粒。
色譜柱管的預處理步驟有哪些？
HPLC色譜柱應使用原供應商提供的效能測試報告上規定的流動相進行沖洗，沖洗時流速由0.1ml/min開始每隔20～30min上調0.1ml/min直到比正常使用時流速高0.2～0.3ml/min時為止。並在每個流速段記下壓力值，壓力不得高於供應商提供的效能測試報告上顯示的值（與相同流速時的比較），如果壓力高於柱效測試報告上顯示的值，則該色譜柱按不合格做退貨處理。將測試過程記錄在《色譜柱驗收記錄》第Ⅱ部分上。
GC色譜柱的預處理
填充柱的柱管在使用前應該經過清洗處理和試漏檢查。清洗的方法與柱管材料有關。對於不鏽鋼管，通常先用10%熱氫氧化鈉水溶液浸泡，抽洗除去管內壁的油汙，然後用自來水洗至中性。如果用1:20的稀鹽酸水溶液重複處理一次，則可顯著降低柱內壁的吸附作用。玻璃柱的清洗可參照上面所述的方法，不同的是通常使用洗液浸泡。同樣，為了減少玻璃內壁的活性，可以用5%二甲基二氯矽烷的甲苯溶液浸泡處理，然後用甲苯和甲醇分別沖洗乾淨。柱子的檢漏方法比較簡單: 可將柱子泡在水裡，堵死柱的一端，在另一端通氣，若無氣泡冒出即說明柱子無洩漏現象。
毛細管柱在使用前諮詢生產廠家是否需要進行切除死堵和老化處理，如需要進行按照下述方法執行：
老化：連線好色譜柱，確保載氣流通，先吹三到五分鐘，吹去色譜柱表面的固定相，老化溫度沒有具體的規定，按照將要進行的分析方法的溫度，進行老化，老化溫度可以高於方法溫度二十到三十度，不要超過色譜柱的最高使用溫度，一般對於交聯鍵和的柱子老化三個小時就夠了，分子篩的和聚合物的柱子老化時間要長，具體諮詢生產廠家。
切除死堵：在使用柱之前切除柱子前後兩端的死堵部分後方可接入色譜儀使用。
通常都是這樣
新買的液相色譜柱，在實驗之前要做怎樣的處理
要先進行老化，最簡單快捷的方法是用你準備跑樣的流動相先平衡2個小時左右，再跑幾針樣品，直至主峰的保留時間穩定下來就可以用了。最好在使用之前測試下柱效，方便以後診斷故障或做比較。
新色譜柱第一次使用需要注意些什麼
第一次使用前，最好先處理一下。我們一般是用65%的乙腈/水溶液在0.1-0.5ml/min低速的情況下衝20min，這一過程最好別接檢測器。然後，再漸漸將流速調至1ml/min繼續衝2-8小時。
平時使用的時候，注意色譜柱適用的PH值範圍、水相的比例（長時間使用水相比例高的流動相會損傷ODS柱）。在使用含有緩衝鹽的流動相時，更換前要注意用含水量較多的甲醇過渡，使用完畢後也要含水量較多的甲醇過渡沖洗。
如何正確地使用色譜柱
1、吸附柱色譜
吸附色譜的原理：在一定條件下，矽膠與被分離物質之間產生作用，這種作用主要是物理和化學作用兩種.物理作用來自於矽膠表表面與溶質分子之間的範德華力.化學作用主要是矽膠表面的矽羥基與待分離物質之間的氫鍵作用。
色譜管為內徑均勻、下端縮口的硬質玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應儘可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果。除另有規定外，通常多采用直徑為0.07～0.15mm的顆粒。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時的流速，均按各品種項下的規定。
2、分配柱色譜
方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前，先將載體和固定液混合，然後分次移入色譜柱中並用帶有平面的玻棒壓緊；供試品可溶於固定液，混以少量載體，加在預製好的色譜柱上端。洗脫劑需先加固定液混合使之飽和，以避免洗脫過程中兩相分配的改變。
擴充套件資料：
色譜柱的大小規格由待分離樣品的量和吸附難易程度來決定。一般柱管的直徑為0.5～l0 cm，長度為直徑的10～40倍。填充吸附劑的量約為樣品重量的20～50倍，柱體高度應占柱管高度的3/4，柱子過於細長或過於粗短都不好。
裝柱前，柱子應乾淨、乾燥，並垂直固定在鐵架臺上，將少量洗脫劑注入柱內，取一小團玻璃毛或脫脂棉用溶劑潤溼後塞入管中，用一長玻璃棒輕輕送到底部，適當搗壓，趕出棉團中的氣泡，但不能壓得太緊，以免阻礙溶劑暢流 （如管子帶有篩板，則可省略該步操作）。再在上面加入一層約0.5 cm厚的潔淨細砂，從對稱方向輕輕叩擊柱管，使砂面平整。
常用的裝柱方法有幹裝法和溼裝法兩種。
1、幹裝法：在柱內裝入2/3溶劑，在管口上放一漏斗，開啟活塞，讓溶劑慢慢地滴入錐形瓶中，接著把幹吸附劑經漏斗以細流狀傾瀉到管柱內，同時用套在玻璃棒 （或鉛筆等）上的橡皮塞輕輕敲擊管柱，使吸附劑均勻地向下沉降到底部。
填充完畢後，用滴管吸取少量溶劑把粘附在管壁上的吸附劑顆粒衝入柱內，繼續敲擊管子直到柱體不再下沉為止。柱面上再加蓋一薄層潔淨細砂，把柱面上液層高度降至0.1～l cm，再把收集的溶劑反覆迴圈通過柱體幾次，便可得到沉降得較緊密的柱體。
2、溼裝法：基該方法與幹裝法類似，所不同的是，裝柱前吸附劑需要預先用溶劑調成淤漿狀，在倒入淤漿時，應儘可能連續均勻地一次完成。如果柱子較大，應事先將吸附劑泡在一定量的溶劑中，並充分攪拌後過夜 （排除氣泡），然後再裝。
無論是幹裝法，還是溼裝法，裝好的色譜柱應是充填均勻，鬆緊適宜一致，沒有氣泡和裂縫，否則會造成洗脫劑流動不規則而形成“溝流”，引起色譜帶變形，影響分離效果。
參考資料來源：百度百科-柱色譜
對於新的色譜柱首先要進行如何操作才可以使用
首先看說明書，說明書會說明飽和色譜柱的溶劑是什麼，用何種溶劑沖洗。首次使用時先要對色譜柱沖洗，然後才能使用。
新買色譜柱如何前處理
毛細還是填充，買的柱子上面都有注意事項。按照注意事項操作。一般線老化但是老化溫度不能超過最高使用溫度。再就是注意柱子接的方向
趣知科普吧
