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低溫儲存的方法

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低溫儲存的方法

1、低溫儲存又稱最小生長法儲存,是20世紀70年代發展起來的新興技術。

2、這種儲存方法是將外植體所再生的試管苗在低溫條件下,結合某些特定的培養基如增加蔗糖濃度、新增甘露醇、山梨醇、脫落酸等生長延緩因子,輔以培養環境的調控,從而抑制或延緩生長,延長壽命,達到儲存種質的目的。儲存物處於無生長或緩慢生長狀態下,需要時可迅速恢復生長。抑制生長的外植體可以是莖尖、莖段以及愈傷組織,但一般多用頂端分生組織作為外植體。

3、這些外植體取材容易,生活力的鑑定一目瞭然,需要時繁殖迅速。其主要的研究內容是,在低於正常培養所需光照、溫度條件下篩選合適的生長延緩因子及其濃度,探討儲存材料最長儲存時間及其存活率和再生率,分析其遺傳穩定性,以優化最佳的儲存條件。這種儲存方法經幾十年的發展,技術上較完善,基本上可在保證有較高的存活率和較低的變異率的前提下,儲存植物種質資源0.51年或幾年。

4、1986年,國際植物遺傳資源委員會出版的《試管苗基因庫計劃和操作》一書中,首先支援木薯、甘薯、可可、香蕉、柑橘等作物試管苗儲存研究。國際熱帶農業研究中心建立了木薯試管苗儲存庫,收集了3500多份木薯,已有50%以上的材料貯藏在生長緩慢的試管苗基因庫中。國際馬鈴薯中心已進行了甘薯試管苗儲存研究。荷蘭Wageningen農業大學已研究了椰子、香蕉、甘薯等的低溫儲存,並將芋組織培養在黑暗及9攝氏度條件下,儲存了42個月後,其存活率為100%。

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