細菌的儲存方法|細菌儲存的常用方法

1、細菌儲存於穿刺培養物中：一般細菌儲存於穿刺培養物可以維持兩年。具體方法如下：用滅菌接種針挑取分散良好的單菌落，針緩慢穿過瓊脂到達瓶底，連續幾次，蓋上瓶蓋擰緊，做好標記。室溫下存放於暗處。（最好一點可以將瓶蓋放鬆，在適當溫度下培養過夜，再擰緊瓶蓋並加封Parafilm膜，室溫或最好在4度避光儲存）。

2、細菌儲存於含有甘油的培養物中：（1）：在液體培養基中生長的細菌培養物：取0.85ml細菌培養物，加入0.15ml高壓滅菌甘油，振盪培養物使甘油分佈均勻，然後轉移到標記好的儲存管內，密封，在乙醇－乾冰或液氮中凍結後再轉至－70度長期儲存。在復甦時，用滅菌接種針刮取凍結的培養物表面，然後立即把黏附於接種針上的細菌劃於含適當抗生素的LB瓊脂平板表面，於37度過夜。

（2）：在瓊脂平板上生長的細菌培養物：從瓊脂平板表面刮下細菌放入裝有2mlLB的無菌試管內，再加入等量的含有30％滅菌甘油的LB培養基，振盪使甘油完全分佈均勻後，分裝於無菌儲存管內，密封，再按前述方法冰凍儲存。這一方法的優點在於可用於儲存在質粒載體上建立的cDNA文庫。