1、神犬小七（小七飾演）：絕對忠誠，敢愛敢恨，有很多神奇的本領，是個充滿正能量的神奇狗狗。小七與母親小五和呂一丹、賈長安夫婦一起生活，因夫妻離婚被迫分開，小七跟隨呂一丹，並在呂一丹病逝後被託付給亮亮，一人一犬相互看不順眼，卻不得不生活在一起，留在寵物診所。小七爲了整亮亮，經常在丁涵和亮亮之間製造矛盾。但隨着一起經歷許多挫折和感動，小七和亮亮之間的關係，也逐漸由相互敵視，最終成爲親密無間的夥伴，並一起協助警察破案，一起保護小動物……神犬的奇蹟，正在都市上演。
2、丁涵（郭碧婷飾演）：外表冷漠刻板，不苟言笑，內心善良溫柔，渴望愛與關懷卻不善表達。寵物診所的院長，對動物非常有愛心，憑一己之力開辦寵物診所。神犬小七和鬼馬亮亮的闖入，打破了她長期封閉的內心世界，讓她又愛又恨。在相處中，她看到亮亮看似放蕩不羈的外表下，內心的善良和堅持。不知不覺，她對這個男人漸漸產生了好感，但還是不肯表露自己，因爲她知道亮亮心裏忘不了初戀，而且他的夢想在大洋彼岸。動物診所的大火後，亮亮放棄夢想回到她和小七身邊，兩人歷盡劫波，修成正果。
3、艾亮（金世佳飾演）：玩世不恭，自命不凡，二貨一枚，骨子裏真誠而善良。出身二線城市家庭，醫科大學碩士，理想是去美國進修成爲一名優秀的醫生。在實習期間因爲英雄救美被醫院開除，爲了籌集赴美費用，不得不就職於自己一向看不上的寵物診所。在這裏，因爲重遇初戀呂一丹結識了小七，並在呂去世後承擔起照顧小七的責任。開始被小七整的很慘，在寵物診所也受到同事們的一致鄙視。倔強的他在院長丁涵的刺激下決心拿下獸醫資格證，在與丁涵的相處中，與小七的漸漸瞭解中，愛上了丁涵，也與小七成爲密友，最終爲了丁涵和小七放棄曾經的志願，與他們一起守護寵物診所。
4、于飛（王煜飾演）：寵物醫院醫生，外表冷血，性格古怪，醫術精湛，熱衷於自己的科研工作，看似冷酷的他對花姐的女兒丫丫百般照顧，也對花姐產生曖昧情愫。
5、阿雅（王洋飾演）：寵物診所護士
6、樂樂（朱佳煜飾演）：聰明可愛，具有畫畫天賦，家境富裕卻極其孤單、渴望父母關懷。自從見到小七勇鬥歹徒的場面，自認爲小七乃是哮天犬，對其朝思暮想，終有一天與小七相見，並將其領回家中，度過了他一生最美好的時光。
7、《神犬小七》是完美影視江何工作室出品的時尚寵物情感劇，是“神犬”系列電視劇的第二部，由王小列執導，拉布拉多犬小七、金世佳、郭碧婷、朱佳煜領銜主演。該劇講述了一隻叫“小七”的神犬如何改變它周圍的人，呈現“都市人犬情”的溫情故事。
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